Ako vyrobiť BDA (agar zo zemiakovej dextrózy)

Autor: Sara Rhodes
Dátum Stvorenia: 14 Február 2021
Dátum Aktualizácie: 23 V Júni 2024
Anonim
Ako vyrobiť BDA (agar zo zemiakovej dextrózy) - Články
Ako vyrobiť BDA (agar zo zemiakovej dextrózy) - Články

Obsah

Agar dextróza zemiakov (BDA) je dobré polotuhé médium na všeobecné použitie používané na tvorbu húb. Často sa tiež používa na izoláciu, rast a udržanie druhov húb vo formácii. Pripravené Petriho misky alebo skúmavky obsahujúce BDA je možné zakúpiť alebo BDA možno rýchlo vyrobiť s použitím komerčnej premixu. Nie je však ťažké vytvoriť jednoduchú a efektívnu verziu s nízkymi nákladmi.


inštrukcia

zemiakový (Zedcor je úplne vlastnený / PhotoObjects.net / Getty Images)

    Príprava zemiakového extraktu

  1. Zemiaky dajte na panvicu s asi 1,2 litrami vody z vodovodu a hodinu varte na sporáku.

  2. Vyberte panvicu z tepla a ochlaďte kvapalinu, kým sa s ňou nebude pohodlne manipulovať (asi desať minút).

  3. Kvapalný extrakt zemiakov nalejte cez filter alebo gázu a odoberte do inej nádoby.

    Príprava zmesi

  1. Pridá sa dextróza a agar do štvorca vody pre extrakciu zemiakov.

  2. PH roztoku sa testuje na papieri s pH testerom alebo pH metrom.

  3. Ak je pH nad 6,5, znížte ho pridaním jednej kvapky roztoku kyseliny chlorovodíkovej zakaždým a vykonajte ďalší test.


  4. Ak je hodnota pH nižšia ako 6, upravte ju pridaním jednej kvapky roztoku hydroxidu sodného naraz a vykonaním nového testu.

    sterilizácie

  1. Dobre premiešajte a rozdelte na menšie dávky po 250 ml. Nalejte do štyroch 500 ml injekčných liekoviek (každá injekčná liekovka by mala byť napoly plná, aby nedošlo k varu).

  2. Každú injekčnú liekovku nabite kusom voľne zloženej hliníkovej fólie tak, aby fólia nespadla, ale nevytvárajte ani úplné tesnenie.

  3. Nádoby vložte do tlakového hrnca.

  4. Tlakový hrniec prevádzkujte podľa pokynov výrobcu na sterilizáciu BDA pri teplote 121 ° C a tlaku 15 psi počas 15 minút.

  5. Vypnite tlakový hrniec a nechajte ho vrátiť na atmosférický tlak, potom vyberte fľaštičky a nechajte vychladnúť, kým sa s nimi nebude manipulovať.


    Zmes sa naleje

  1. Zarovnajte Petriho misky na rovnom povrchu.

  2. Akonáhle sa fľaštičky ochladia na teplotu spracovania, ale predtým, ako médium začne tuhnúť, držte injekčnú liekovku jednou rukou a druhou rukou odstráňte kryt fólie.

  3. Pre každú Petriho misku odstráňte veko jednou rukou, rýchlo naplňte polovicu tekutým BDA a nasaďte veko.

  4. Opakujte krok 3 vyššie, až kým sa všetky Petriho misky nevyplnia.

  5. Ak zostane nejaký BDA, vyberte fľašu s originálnym fóliovým viečkom, nechajte vychladnúť a stuhnúť, utiahnite hliníkové veko a uložte do chladničky.

tipy

  • Väčšina húb rastie dobre za mierne kyslých podmienok, takže konečná hodnota pH by mala byť medzi 6 a 6,5, hoci môže byť upravená na akékoľvek pH požadované pre konkrétny druh.
  • Nechajte kryty Petriho misiek otvorené len tak, aby sa zmes mohla naliať a aby bola čo najrýchlejšie zakrytá.
  • Trvá prax, aby sa rýchlosť a účinnosť rozliatia agaru v Petriho miskách.
  • Po ochladení a stuhnutí môžu byť nádoby BDA zabalené do plastu a uskladnené v chladničke niekoľko mesiacov.
  • Väčšina vody z vodovodu obsahuje minerály prospešné pre rast húb, avšak ak má miestna voda extrémne koncentrácie minerálov alebo veľmi vysoké alebo nízke pH, nahraďte ju destilovanou vodou.

varovanie

  • Dodržiavajte všetky prevádzkové a bezpečnostné pokyny pre tlakový hrniec.
  • Pri sterilizácii tlakového hrnca nechajte uzávery fliaš voľné, aby nedošlo k pretlaku.
  • Pri manipulácii s horúcimi nádobami používajte rukavice odolné voči teplu.
  • Pri manipulácii s tlakovým hrncom pri odstraňovaní sterilného BDA a počas nalievania noste ochranné okuliare.

Čo potrebujete

  • 300 g zemiakov olúpaných a narezaných
  • panvica
  • Kuchynské sitko
  • PH tester alebo pH meter
  • 1 molárna kyselina chlorovodíková
  • 1 molárny hydroxid sodný
  • 4 500 ml injekčné liekovky Ehrlenmayerovho skla (alebo iné autoklávovateľné nádoby s úzkymi ústami)
  • 10 g dextrózového (glukózového) prášku
  • 20 g agaru
  • Hliníková fólia
  • Tlakový hrniec
  • Sterilné Petriho misky