Obsah
Rastové médium, tiež známe ako kultivačné médium, je kvapalné alebo želatínové, alebo v ktorom mikrobiológovia vyvíjajú mikroorganizmy.Najväčší prelom v identifikácii mikroorganizmov nastal, keď Robert Koch a jeho kolegovia vyvinuli techniky potrebné na vývoj a izoláciu jednotlivých druhov baktérií pomocou pevných médií. Aj keď tento vynález a jeho mnohé výhody spôsobili revolúciu v oblasti mikrobiológie, existujú určité nevýhody.
zloženie
Pre rast mikroorganizmov, ako sú baktérie, je potrebné poskytnúť im environmentálne a nutričné podmienky podobné tým, ktoré sa nachádzajú v ich prirodzenom prostredí. Kultivačné médium musí poskytovať všetky výživové požiadavky potrebné na rast, vrátane vody, zdroja uhlíka a energie, zdroja dusíka, stopových prvkov a rastových faktorov. Zložky bežných kultivačných médií zahŕňajú vodu, agar, mäsový extrakt, kvasinkový extrakt, sladový extrakt, peptón a hydrolyzovaný kazeín.
konzistencia
Kultivačné médiá sa klasifikujú niekoľkými spôsobmi, pričom jedným z nich je konzistencia. Kvapalné médiá, bežne označované ako bujóny, sú dostupné vo fľašiach, bankách a skúmavkách. Pevné médium je kvapalné médium, do ktorého sa pridalo tuhnúce činidlo, všeobecne agar. Agar sa skladá z viazaných molekúl cukru, nazývaných polysacharidy, a získava sa z niektorých druhov červených morských rias. Roztopí sa pri 100 ° C a tuhne pri asi 43 ° C. Pevné médium sa používa vo forme šikmých skúmaviek alebo rúrok. Platne sú ploché, valcovité nádoby s viečkami, nazývané Petriho misky, ktoré obsahujú pevné médiá. Šikmé prostriedky sú vytvorené umiestnením roztavených médií do rúr a ich ochladením pod uhlom, ktorý vytvára dlhý a šikmý rastový povrch. Koncentrácia 1,5% agaru je typická pre platne a naklonené médiá.
výhody
Pevné médium je užitočné tam, kde je pravdepodobné, že vzorka bude obsahovať zmiešanú populáciu baktérií. Keď sú plaky správne naočkované, baktérie rastú ako odlišné jednotky tvoriace kolónie. To umožňuje predpokladanú identifikáciu na základe vzhľadu bakteriálnej kolónie a umožňuje prípravu čistých subkultúr. Včasná predbežná identifikácia pomáha lekárom včasné výbery liečby. Čisté subkultúry umožňujú presnú identifikáciu baktérií a testovanie antimikrobiálnej citlivosti. Bakteriálne kontaminanty sú tiež dobre viditeľné na pevných médiách.
nevýhody
Mikroorganizmy majú rôzne potreby kyslíka. Aeróbne organizmy vyžadujú kyslík, zatiaľ čo anaeróby prežijú len v ich neprítomnosti. Na rozdiel od kvapalných médií tuhé médium nepodporuje súčasný rast aeróbnych a anaeróbnych baktérií. Následne by sa mali duplicitné plaky naočkovať a inkubovať v oboch atmosférach. Pevné médium nemôže obsahovať veľké objemy inokula, typicky väčšie ako 0,05 ml. Keďže platne kultivačného média sú plytké a majú veľké povrchové plochy, môžu rýchlo dehydratovať a stratiť schopnosť podporovať rast v priebehu niekoľkých dní, ak sa neprijmú opatrenia na prevenciu odparovania.