Obsah
PCR je metóda, ktorú vedci používajú na výrobu miliónov kópií segmentu DNA. Polymerázy - typ proteínového enzýmu - pomáhajú vytvárať nové segmenty. Vedci často používajú polymerázu Taq v PCR.
histórie
Taq polymeráza pochádza z baktérie Thermus aquaticus, ktorá žije v termálnych vodách. Kary Mullis a Fred Faloona vyvinuli PCR v polovici 80-tych rokov s použitím pôvodne polymerázy Escherichia coli, ale vedci čoskoro začali používať Taq v PCR, pretože bola odolnejšia voči vysokým teplotám.
funkcie
PCR zahŕňa kroky denaturácie, anelácie a replikácie, obvykle opakované 20 až 30 krát. Denaturácia oddeľuje dvojité vlákno DNA na izolované vlákna. V kroku anelácie sa priméry viažu na segmenty DNA, ktoré sa majú kopírovať. Taq polymeráza začína pracovať na stupni replikácie: polymeráza sa zostavuje z každého jednotlivého vlákna DNA označenej primérom, novým dvojitým vláknom.
výhody
Vysoké teploty potrebné na denaturáciu DNA zničili polymerázu E. coli pôvodne použitú v PCR, čo si vyžadovalo pridanie ďalšieho enzýmu do každého cyklu. Taq polymeráza môže odolať týmto teplotám, takže vedci teraz môžu robiť viac PCR cyklov automaticky.
úvahy
Taq polymeráza má relatívne vysokú chybovosť zdvojenia DNA. Iné polymerázy stabilné pri vysokých teplotách majú nižšiu chybovosť, ale Taq je stále najpoužívanejší kvôli svojej spoľahlivosti a univerzálnosti.