Obsah
- Nevýhody techniky prietokovej cytometrie
- Nízky prietok buniek
- Potreba vysoko kvalifikovaných operátorov
- Prietokové cytometre sú drahé
Prietoková cytometria, technika, ktorá pomáha charakterizovať mikroskopické častice, ako sú bunky a chromozómy, umožňuje simultánnu analýzu fyzikálnych a chemických charakteristík tisícov častíc za sekundu a na základe rôznych vedeckých parametrov. Separácia buniek fluorescenciou, ktorá je špecializovanou formou prietokovej cytometrie, môže tiež rozdeliť heterogénnu zmes buniek na dva alebo viac kmeňov podľa ich vlastností odrážajúcich fluorescenčné svetlo. Prístroje založené na tomto koncepte sú mimoriadne výkonným vedeckým prístrojom používaným vo výskumných a mikrobiologických laboratóriách na fyzickú separáciu buniek. Táto technika je tiež užitočná pri diagnostike chorôb, ako je leukémia (rakovina krvi).
Nevýhody techniky prietokovej cytometrie
Používanie tejto vedeckej techniky však má niekoľko závažných obmedzení. Pretože sú výsledky prietokovej cytometrie analyzované na agregovanej úrovni, nie je ľahké pozorovať a merať správanie jednotlivých buniek. Pretože táto technika navyše vyžaduje prechod buniek prúdom kvapaliny, obmedzuje analýzu iba na suspendované bunkové roztoky. Z toho istého dôvodu musia byť tkanivové bunky disagregované z tkaniva, čo sa uskutoční ošetrením intaktných tkanív enzýmom, ktorý zvýrazní tieto bunky na ďalšiu analýzu.
Nízky prietok buniek
Jednou z najväčších nevýhod prietokových cytometrov je ich nízky prietok bunkami. Aj pri vysokorýchlostných odlučovačoch je rýchlosť nižšia ako niekoľko tisíc buniek za sekundu. Mnoho experimentov však vyžaduje veľké množstvo buniek. Takže aj vysokorýchlostné separátory musia pracovať dlho, čo je nielen drahé, ale môže spôsobiť aj problémy s kvalitou, pretože tieto bunky prechádzajúce veľmi dlhými procesmi už nemusia byť v experimentoch použiteľné. Tento problém sa môže zhoršiť, keď musia byť samostatné bunky v sterilnom prostredí. Aj keď vysokorýchlostné prietokové cytometre môžu poskytovať sterilné bunky, robí to proces zložitejším a znižujú prietok.
Potreba vysoko kvalifikovaných operátorov
Pretože prietokový cytometer je veľmi sofistikované zariadenie, môže ho obsluhovať a dosiahnuť prijateľnú úroveň použitia so zariadením iba kvalifikovaný a vysoko vyškolený personál.
Prietokové cytometre sú drahé
Prietokové cytometre sú drahé nástroje, ktoré je potrebné kupovať a udržiavať. Laserový prietokový cytometer, ktorý dokáže analyzovať iba bez separácie, stojí takmer 200 000 R $, zatiaľ čo cytometer na báze žiarovky stojí o niečo menej, okolo 150 000 R $. Prietokové cytometre so zvýšenou schopnosťou separovať bunky môžu stáť takmer dvakrát toľko ako ich lacnejšie verzie. Okrem toho je uskutočnenie vysokorýchlostnej separácie ďalším opakujúcim sa nákladom, ktorý obvykle stojí tisíce realít za každé použitie.