Ako pestovať huby od spór

Obsah

inštrukcia
Príprava materiálov
Umiestnenie spór na platne
Izolácia čistej kultúry
Príprava potomstva
Inokulácia substrátu pre rast húb
tipy
varovanie
Čo potrebujete

Huby sa môžu pestovať zo spór alebo tkanivovej kultúry. Kultúry spór majú za následok populácie geneticky odlišných húb. Je užitočná pri izolácii a testovaní nových kmeňov. Postupy pre rozvoj húb sú druhovo špecifické. Predpokladá sa, že výrobca vie, ako pestovať huby, ktoré sú predmetom záujmu, najmä potom, čo sa získa dostatok potomstva.

inštrukcia

Zbierka húb Agaricus (Fotografie Iana Granta, Jasona Hollingera)

Príprava materiálov

Pripravte 500 až 1000 ml MEA podľa pokynov výrobcu.
Roztok chloridu sodného sa umiestni do skúmaviek a MEA do Erlenmeyerových baniek. Neumiestňujte skúmavky a injekčné liekovky viac ako do polovice a mierne zakryte.
Roztok chloridu sodného, MEA a Petriho misiek (ak nie sú sterilné) sa sterilizuje v tlakovom hrnci pri 121 ° C a 1 atm počas 15 až 20 minút.
MEA, roztok chloridu sodného a Petriho misky vyberte z tlakového hrnca a nechajte vychladnúť.
Keď MEA dostatočne vychladne, aby sa s ním mohlo manipulovať, ale pred stuhnutím, opatrne zdvihnite veko z každej Petriho misky a nalejte 10 až 20 ml roztavenej MEA.
MEA a platne chloridu sodného sa nechajú vychladnúť na teplotu miestnosti.

Umiestnenie spór na platne

Háčik sterilizujte v alkoholovej lampe. Nechajte drôt zahriať, kým sa nerozsvieti na červeno, potom nechajte vychladnúť 5 sekúnd.
Ponorte háčik do roztoku chloridu sodného, aby ste zachytili kvapku tekutiny. Rozprestrite kvapku na malej ploche dojem spór (alebo iného zdroja spór) na vytvorenie zmesi kvapalina / spór. Opakujte tento postup niekoľkokrát, sterilizujte háčik medzi každým.
Ponorte háčik do suspenzie chloridu sodného a spór, aby ste zachytili spóry.
Zdvihnite veko agarovej platne len tak, aby bol umožnený prístup k háku.
Suspenziu spór rozložte z háčika na povrch agaru a platňu znova odoberte. Opakujte toľko kariet, koľko chcete (aspoň päť alebo šesť).
Zatvorte agarové platne plastovým obalom, aby ste zabránili vysušeniu. Spory inkubujte pri vhodnej teplote a svetelných podmienkach pre daný druh.
Sledujte príznaky každých pár dní a hľadajte známky klíčenia. Biely nadýchaný rast (mycélium) na povrchu agaru indikuje prítomnosť huby (ale nemusí to byť huba, ktorá vyrastala zo spór).

Pestovanie húb zo spór

Izolácia čistej kultúry

Porovnajte mycelium s publikovanými opismi mycélia, ktoré sa pokúšate pestovať.
Ak mycelium vyzerá ako očakávané, očistite kultúru vyrezaním kusov a ich prenesením na čerstvé agarové platne.
Pokračujte v rezaní kúskov z hrotu rozširujúcich sa kolónií, až kým nie je čistá kolónia bez baktérií.

Príprava potomstva

Rezané a prenesené kusy purifikovaného mycélia do sterilizovaných sklenených fliaš alebo substrátu drevených triesok. Typ použitého substrátu závisí od druhu huby.
Hlavné mycelium sa inkubuje za podmienok vhodných pre daný druh až do úplného kolonizácie substrátu mycélií.
Pravidelne pretrepávajte nádoby s mycélií, aby sa fragment rozdelil a kolonizácia sa urýchlila.
Použite hlavné mycelia na inokuláciu iných nádob a produkte viac mycélia.

Inokulácia substrátu pre rast húb

Nádoby s mycélií dôkladne pretrepte, aby ste ich fragmentovali.
Umiestnite mycéliu do vriec alebo podnosov pre rast húb.
Mycelia sa opatrne premieša na substráte, za miešania alebo miešania.
Postupujte podľa publikovaných metód, ako pestovať mycélium a začať proces rodenia druhov, ktoré sa pestujú.

tipy

Pracujte rýchlo, keď vylievate agar alebo prenesiete inokulum, aby sa znížila kontaminácia.
Čas a úsilie možno ušetriť kúpou sterilných a vopred pripravených agarových platní.
MEA je dobré všeobecné médium pre pestovanie húb, ale iný druh média môže byť vhodnejší v závislosti od druhu.

varovanie

Tlakové hrnce sa môžu zahriať a spôsobiť zranenie. Dodržiavajte pokyny výrobcu týkajúce sa údržby a prevádzky.
Sterilizované nádoby sú horúce a musí sa s nimi manipulovať pomocou tepelne odolných rukavíc, aby sa zabránilo popáleniu a rozliatiu.
Veko nádoby nechajte sterilizovať, aby sa tlak počas procesu ohrevu a chladenia vyrovnal.
Všetky nádoby, ktoré sa majú sterilizovať, musia byť vyrobené z autoklávovateľného materiálu.